تعیین مقدار کاتچین در محلول آبی توسط روش کمیلومینسانس Determination of Catechin in Aqueous Solution by Chemiluminescence Method
- نوع فایل : کتاب
- زبان : فارسی
- ناشر : اسپرینگر Springer
- چاپ و سال / کشور: 2005
توضیحات
رشته های مرتبط: شیمی، زیست شناسی، بیوشیمی، علوم گیاهی، شیمی تجزیه و شیمی آلی
یک روش برای تعیین کاتچین در محلول آبی توسط اندازه گیری شدت های کمیلومینسانس با استفاده از سیستم جریان متوقف شده مطالعه شده بود. واکنش کمیلومینسانس هیدروژن پراکسید_ لوسیژنین برای تعیین مقدار کاتچین انتخاب شده بود. یون آهنII)) به سیستم کمیلومینسانس به منظور افزایش حساسیت اضافه شد. شدت کمیلومینسانس سیستم لوسیژنین با افزایش کاتچین اضافه یافت. اثرات نرخ جریان معرف و نمونه و غلظت های لوسیژنین، پراکسید هیدروژن، یون آهن(II) و KOH مطالعه شد. منحنی کالیبراسیون برای کاتچین خطی بود روی رنجی از ۱×〖۱۰〗^(-۶) تا ۱×〖۱۰〗^(-۳) مولار و حد تشخیص ۳×〖۱۰〗^(-۷) مولار تحت شرایط آزمایشگاهی بهینه بود. کاتچین ها گروهی از ترکیبات پلی فنولی هستند که به شکل مازاد در چای سبز یافت می شوند. اصلی ترین ترکیبات پلی فنولی در کاتچین شامل اپی کاتچین (EC)، اپیک گالو کاتچین (EGC)، اپی کاتچین گالات (ECG) و اپی گالو کاتچین گالات (EGCG). کاتچین ها بررسی شده اند که نشان دهند اثرات محافظتی بر علیه سرطان و بیماری های قلبی_ عروقی و تورمی. این موضوع پیشنهاد می کند که ترکیبات پلی فنولی مثل کاتچین ها ممکن است یک نقش مهم در گیر انداختن رادیکال های آزاد مثل رادیکال های هیدروکسیل، رادیکال های پراکسیل، رادیکال های آنیونی سوپر اکسید و اکسید نیتریک در سیستم های زنده . چندین روش تشخیص سنتی برای کاتچین وجود دارد : شناسایی HPLC-UV، شناسایی الکترو شیمیایی و روش کمیلومینسانس. در میان این روش ها، روش کمیلومینسانس بررسی می شود که حساس ترین روش باشد بر اساس این حقیقت که آن احتیاج به یک منبع نور برانگیختگی به عنوان تجزیه و تحلیل کنندگان طیف سنجی و فلئومتری. هدف این مقاله ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی کاتچین با استفاده از کمیلومینسانس به منظور تعیین غلظت کاتچین است. شرایط تجزیه و تحلیل بهینه مثل غلظت های KOH، H_2 O_2، لوسیژنین و یون Fe (II) و نرخ های جریان مطاله شد. تجربی _ مواد لوسیژنین (بیس –N- متیل اکریدینیوم نیترات) و کاتچین هیدرات (۹۸%) از Aldrich تهیه شد. پراکسید هیدروژن (۳۰%) و KOH (حداقل ۸۵%) به ترتیب از Junsei و Dunksan تهیه شد. فروس آمونیوم سولفات از شرکت Wako تهیه شد. آب دیونایز با استفاده از سیستم مپلی پور تهیه شد و تهیه شد و در تمام واکنش و آزمایش از آن استفاده شد. محلول استوک کاتچین با حل کردن یک میزان مکفی از آی دیونیزه و سپس با رقیق کردن با آب دیونیزه برای رسیدن به یک غلظت ۱×〖۱۰〗^(-۲) مولار آماده شد. دستگاه ها: دیاگرام یک تجزیه و تحلیل کننده تزریق جریان اتوماتیک شده که در اندازه گیری های کمیلومینسانس استفاده شد در شکل ۱ نشان داده شده است. جریان سیستم استفاده شده در این کار شامل دو پمپ زیگزاگی نشان داده شده است. پمپ ۱ یک محلول شناساگر کمیلومینوژنیک، H_2 O_2، KOH و آهن(II). و دیگر پمپ ۲ تمام محلول نمونه را می کشد. محلول نمونه با سلول جریان ادغام شده است. لوله کشی PTFE ( قطر داخلی ۰٫۰۴۰) برای برقرار کردن تمام اجزای این سیستم به کار رفته بود. یک دسته فیبر نوری دو چنگاله به سلول جریان پیچانده شده بود برای مکان نوک حساس فیبر نوری که برای هر آزمایش یکسان باشد. سلول جریان در یک اتاقک نور شدید ساخته شده در آزمایشگاه برای حذف تمام نورهای از دست رفته غیر ضروری جای داده شده بود. یک سر بسته فیبر در مقیاس ۱۰mm ثابت شده بود قبل از پورت نشر و انتهای دیگر در ۱۰mm قبل از پورت برانگیختگی اجزای سلول اسپکتروفتومتری فلئورسانی. برای ثبت طیف نشری و براگیختگی، یک لامپ زنون ۴۵۰ استفاده شد. برای اندازه گیری کمیلومینسانس، لامپ زنون خاموش شد و لومینسانس که از سلول نشر یافته بود به یک لوله تکثیر کننده نور هدایت شد. ولتاژ استفاده شده برای لوله تکثیر کننده نور ۹۵۰ ولت بود. مود اکتساب استفاده شده، سگنال/مرجع (S\R) برای طیف برانگیختگی و نشر و سیگنال (S) برای اندازه گیری های کمیلومینسانس بود. شدت کمیلومینسانس ۴۷۳ نانومتر برای تقین کاتچین استفاده شد. برای اندازه گیری های کمیلومینسانس، زمان ادغام و عرض شکاف بستر ۱s و ۰٫۵۰mm بود.
یک روش برای تعیین کاتچین در محلول آبی توسط اندازه گیری شدت های کمیلومینسانس با استفاده از سیستم جریان متوقف شده مطالعه شده بود. واکنش کمیلومینسانس هیدروژن پراکسید_ لوسیژنین برای تعیین مقدار کاتچین انتخاب شده بود. یون آهنII)) به سیستم کمیلومینسانس به منظور افزایش حساسیت اضافه شد. شدت کمیلومینسانس سیستم لوسیژنین با افزایش کاتچین اضافه یافت. اثرات نرخ جریان معرف و نمونه و غلظت های لوسیژنین، پراکسید هیدروژن، یون آهن(II) و KOH مطالعه شد. منحنی کالیبراسیون برای کاتچین خطی بود روی رنجی از ۱×〖۱۰〗^(-۶) تا ۱×〖۱۰〗^(-۳) مولار و حد تشخیص ۳×〖۱۰〗^(-۷) مولار تحت شرایط آزمایشگاهی بهینه بود. کاتچین ها گروهی از ترکیبات پلی فنولی هستند که به شکل مازاد در چای سبز یافت می شوند. اصلی ترین ترکیبات پلی فنولی در کاتچین شامل اپی کاتچین (EC)، اپیک گالو کاتچین (EGC)، اپی کاتچین گالات (ECG) و اپی گالو کاتچین گالات (EGCG). کاتچین ها بررسی شده اند که نشان دهند اثرات محافظتی بر علیه سرطان و بیماری های قلبی_ عروقی و تورمی. این موضوع پیشنهاد می کند که ترکیبات پلی فنولی مثل کاتچین ها ممکن است یک نقش مهم در گیر انداختن رادیکال های آزاد مثل رادیکال های هیدروکسیل، رادیکال های پراکسیل، رادیکال های آنیونی سوپر اکسید و اکسید نیتریک در سیستم های زنده . چندین روش تشخیص سنتی برای کاتچین وجود دارد : شناسایی HPLC-UV، شناسایی الکترو شیمیایی و روش کمیلومینسانس. در میان این روش ها، روش کمیلومینسانس بررسی می شود که حساس ترین روش باشد بر اساس این حقیقت که آن احتیاج به یک منبع نور برانگیختگی به عنوان تجزیه و تحلیل کنندگان طیف سنجی و فلئومتری. هدف این مقاله ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی کاتچین با استفاده از کمیلومینسانس به منظور تعیین غلظت کاتچین است. شرایط تجزیه و تحلیل بهینه مثل غلظت های KOH، H_2 O_2، لوسیژنین و یون Fe (II) و نرخ های جریان مطاله شد. تجربی _ مواد لوسیژنین (بیس –N- متیل اکریدینیوم نیترات) و کاتچین هیدرات (۹۸%) از Aldrich تهیه شد. پراکسید هیدروژن (۳۰%) و KOH (حداقل ۸۵%) به ترتیب از Junsei و Dunksan تهیه شد. فروس آمونیوم سولفات از شرکت Wako تهیه شد. آب دیونایز با استفاده از سیستم مپلی پور تهیه شد و تهیه شد و در تمام واکنش و آزمایش از آن استفاده شد. محلول استوک کاتچین با حل کردن یک میزان مکفی از آی دیونیزه و سپس با رقیق کردن با آب دیونیزه برای رسیدن به یک غلظت ۱×〖۱۰〗^(-۲) مولار آماده شد. دستگاه ها: دیاگرام یک تجزیه و تحلیل کننده تزریق جریان اتوماتیک شده که در اندازه گیری های کمیلومینسانس استفاده شد در شکل ۱ نشان داده شده است. جریان سیستم استفاده شده در این کار شامل دو پمپ زیگزاگی نشان داده شده است. پمپ ۱ یک محلول شناساگر کمیلومینوژنیک، H_2 O_2، KOH و آهن(II). و دیگر پمپ ۲ تمام محلول نمونه را می کشد. محلول نمونه با سلول جریان ادغام شده است. لوله کشی PTFE ( قطر داخلی ۰٫۰۴۰) برای برقرار کردن تمام اجزای این سیستم به کار رفته بود. یک دسته فیبر نوری دو چنگاله به سلول جریان پیچانده شده بود برای مکان نوک حساس فیبر نوری که برای هر آزمایش یکسان باشد. سلول جریان در یک اتاقک نور شدید ساخته شده در آزمایشگاه برای حذف تمام نورهای از دست رفته غیر ضروری جای داده شده بود. یک سر بسته فیبر در مقیاس ۱۰mm ثابت شده بود قبل از پورت نشر و انتهای دیگر در ۱۰mm قبل از پورت برانگیختگی اجزای سلول اسپکتروفتومتری فلئورسانی. برای ثبت طیف نشری و براگیختگی، یک لامپ زنون ۴۵۰ استفاده شد. برای اندازه گیری کمیلومینسانس، لامپ زنون خاموش شد و لومینسانس که از سلول نشر یافته بود به یک لوله تکثیر کننده نور هدایت شد. ولتاژ استفاده شده برای لوله تکثیر کننده نور ۹۵۰ ولت بود. مود اکتساب استفاده شده، سگنال/مرجع (S\R) برای طیف برانگیختگی و نشر و سیگنال (S) برای اندازه گیری های کمیلومینسانس بود. شدت کمیلومینسانس ۴۷۳ نانومتر برای تقین کاتچین استفاده شد. برای اندازه گیری های کمیلومینسانس، زمان ادغام و عرض شکاف بستر ۱s و ۰٫۵۰mm بود.
Description
A method to determine catechin in aqueous solution by measuring chemiluminescence intensities using a stopped flow system has been studied. The lucigenin-hydrogen peroxide chemiluminescence reaction was chosen for the determination of catechin. Fe(II) ion was added to the chemiluminescence system to increase the sensitivity. The chemiluminescence intensity from the lucigenin system was increased by the addition of catechin. Effects of flow rates of reagent and sample and concentrations of lucigenin, hydrogen peroxide, Fe(II) ion and KOH were investigated. The calibration curve for catechin was linear over the range from 1.0×۱۰-۳ to 1.0×۱۰-۷ M and the detection limit was 3.0×۱۰-۷ M under the optimal experimental conditions.
